細胞增殖實驗

細胞增殖實驗
細胞增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖、遺傳的基礎，是細胞基本的生理活動。生長因子、激素及癌基因產(chǎn)物等均可誘導細胞的增殖或抑制細胞的增殖，通過影響細胞周期、誘導細胞凋亡而實現(xiàn)。

通過細胞分裂，可以將復制的遺傳物質(zhì)，平均地分配到兩個子細胞中去。細胞增殖實驗包括MTT法和CCK8法。

細胞增殖實驗

MTT全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide。MTT比色法是常用的檢測細胞存活和生長的方法之一，其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT 還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜能溶解細胞中的甲瓚，用酶標儀在490nm波長處測定其光吸收值，在細胞數(shù)范圍內(nèi)，甲瓚結晶形成的量與細胞數(shù)成正比，因此490nm波長處的吸光值可間接反映活細胞數(shù)量。該方法已廣泛用于抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。

Cell Counting Kit-8（簡稱CCK-8）試劑可用于簡便而準確的細胞增殖和毒性分析。其基本原理為：該試劑中含有WST-8【化學名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】，它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓*（1-Methoxy PMS）的作用下被細胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物（Formazan dye）。生成的甲瓚物的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析。