硫代乙酰胺(TAA)誘發(fā)肝衰竭模型

(1)復制方法  成年大鼠，硫代乙酰胺(TAA)經(jīng)腹腔注射250～350mg/kg體重，或經(jīng)皮下注射600mg/kg體重，或灌胃300～400mg/kg體重，24h后均分別以原先的劑量和同途徑再給藥1次。給藥后，連續(xù)觀察模型動物的一般狀況，記錄其中毒死亡時間，同時可行顱骨電極包埋手術記錄不同時點的腦電圖，定時抽取血液作肝、腎功能測定，在模型動物死亡或人為處死后，摘取其肝臟組織作病理檢查。在整個實驗過程中，模型動物均以10％葡萄糖生理鹽水作為惟一的飲用水，也可靜脈注射量的5％葡萄糖注射液，每日2次。

(2)模型特點  模型動物在第二次給藥后8h起，出現(xiàn)尿黃，精神萎靡，對外周刺激反應遲鈍或進行性減弱，24h時，血清ALT、BT、TNF-a異常升高，隨后雖有逐步回落的趨勢，但72h內一直維持在較高水平。此外，全血和血漿黏度增加，紅細胞壓積(HCT)提高、紅細胞聚集指數(shù)(EAI)上升，血清AST、BUN、λ-谷氨酰轉移酶(GGT)、脂蛋白-x(LP-x)、內毒素(ET)含量提高，紅細胞剛性指數(shù)(IR)下降。病理檢查可見，模型動物肝臟普遍充血腫大，呈暗紅色，表面有粗糙顆粒；光鏡示，肝臟大片壞死，肝細胞出現(xiàn)水腫和氣球樣變，匯管區(qū)有炎癥細胞浸潤，以中央靜脈為中心，肝小葉呈點狀和灶狀壞死。此時，模型動物翻正反射消失，體顫等共濟失調表現(xiàn)明顯，并隨時間而逐步發(fā)展為嗜睡或昏迷狀，部分動物出現(xiàn)死亡，死亡時間多發(fā)生在48h內。死亡動物口唇、尾部、足部等處有出血和淤點。此外，模型動物腦電圖顯示有典型的肝性腦病三相波(δ波)出現(xiàn)。

(3)比較醫(yī)學  硫代乙酰胺(TAA)是一種肝毒性物質，用其復制肝衰竭動物模型，具有肝實質細胞受損和肝功能衰竭的典型特征，主要表現(xiàn)為：血清ALT、AST、ALP活性升高，肝細胞膜Na+－K+－ATP酶活性降低，血清TBIL、 BUN、ET含量上升，血漿凝血因子水平下降，PT延長，全血和血漿黏度增加，血液和腦室內NH3、AAA和氨基丁酸等神經(jīng)毒質濃度提高，腦電頻率減慢，波幅增大，出現(xiàn)典型的三相波變化。TAA誘導肝衰竭的作用機制除直接損害肝實質細胞外，還可使肝巨噬細胞功能降低、腸源性內毒素血癥形成，后者進一步加重對肝組織的損害。有實驗證明，不同劑量的TAA對模型動物的肝實質細胞損傷和肝性腦病的嚴重程度呈顯著相關。TAA劑量越大，內毒素和血氨水平越高，肝功能損害和肝臟病理變化越明顯，肝性腦病分級評分越高，存在明顯的量一效關系。如給大鼠腹腔注射TAA250mg/kg體重或350mg/kg體重，雖然兩種劑量均能導致100％動物發(fā)生臨床型肝性腦病，但前者分級多為1～2級，無動物死亡，而后者分級則多為3～4級，且動物死亡率達41.7％。由于本模型方法簡便，價格低廉，且與D-GLA肝衰竭所致急性肝功能衰竭動物模型比，模型特征明確，病程相對緩慢，分期易于掌握，所以近年來受到了國內外研究人員的較多重視和應用。但是，本模型一般多局限于以小動物為模型對象，所以其使用的廣泛性受到限制。